產品名稱	目錄號	產品描述	產品包裝	價格/元
EMSA-ProC	SINP005	核蛋白濃度測定試劑盒（操作說明）。	100ml	260

    

一、EMSA對樣品用量的要求。

做EMSA要求樣品中有天然的，有活性，可檢測量的完整DNA/RNA結合蛋白（結合蛋白），還需要樣品上樣準確。只有所有的樣品所用的總蛋白量相同的情況下，各個樣品中的核酸結合蛋白的量與活性才有可比性。遺憾的是，我們接觸到的許多客戶，所測定的核蛋白濃度都有些問題。

二、核蛋白濃度測定常見問題

1. 蛋白標準曲線的范圍太高。一般測定WB樣品濃度的標準曲線范圍一般在5-40hg/ul，因為用于WB的樣品的蛋白濃度一般都在15ug/ul以上。但制定同樣測定范圍的標準曲線來確定核蛋白濃度會造成很大誤差，因為EMSA核蛋白濃度一般在1-2.5ug/ul之間。由于核蛋白濃度低，稍微的誤差就會導致核酸結合蛋白成倍的差別。

2. 核蛋白提取試劑干擾BCA測定的化學劑如EGTA，還原劑等。這些干擾劑會在沒有蛋白的情況下仍然產生明顯的OD讀數，造成蛋白濃度虛高。許多廠家包括碧云天的試劑盒都已經注明了EGTA會干擾BCA的蛋白測定，無視這些警示只會使蛋白濃度虛高，可能導致EMSA失敗。

3. 一些核蛋白提取試劑及操作方法很容易造成胞漿蛋白污染。由于胞漿蛋白濃度比核蛋白高幾十倍，稍微的胞漿污染就可致測定濃度高，但核蛋白/結合蛋白占比大大減少。

4. 相比Bradford法，Lowry法與Folin酚法，BCA法的靈敏度高，重復性好（中國生化藥物雜志，2008 29（4）：277），比較適合做核蛋白濃度測定，但需要排除核蛋白提取試劑中的干擾物。

 

微奧基因的BCA蛋白濃度測定改良試劑主要用于測定EMSA核蛋白濃度，與核蛋白提取試劑配合使用，可排除EGTA，還原劑等的干擾，可獲得可靠的測定結果。客戶可以將微奧基因蛋白測定說明書（查看）與別家試劑盒進行比較，應當可以看出一些差別。